液相色譜儀的梯度洗脫
    液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC）及液-固色譜(LSC）?，F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較，具有、快速、靈敏等特點(diǎn)。對(duì)高沸點(diǎn)、難氣化合物的混合物通過(guò)色譜柱和淋洗劑并以實(shí)現(xiàn)分離。應(yīng)用于生物化學(xué)、生物、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門(mén)。下面武漢恒信世紀(jì)科技有限公司就跟大家講以下關(guān)于液相色譜儀的梯度洗脫。
    液相色譜儀有等強(qiáng)度和梯度洗脫兩種方式。等度洗脫是在同一分析周期內(nèi)流動(dòng)相組成保持恒定，適合于組分?jǐn)?shù)目較少，性質(zhì)差別不大的樣品。梯度洗脫是在一個(gè)周期內(nèi)程序控制流動(dòng)相的組成，如溶劑的性、離子強(qiáng)度和PH值等，用于分析組分?jǐn)?shù)目多、性質(zhì)差異罰大的復(fù)雜樣品。采用梯度洗脫可以縮短分析時(shí)間，分離度，峰形，檢測(cè)靈敏度，但是常常引起基線漂移和降低重現(xiàn)性。 梯度洗脫有兩種方式：低壓梯度（外梯度）和高壓梯度（內(nèi)梯度）。 
  兩種溶劑組成的梯度洗脫可按任意程度混合，即有多種洗脫曲線：線性梯度、凹形梯度、凸形梯度和階梯形梯度。線性梯度常用，尤其適合于在反相柱上進(jìn)行梯度洗脫。 在進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，由于多種溶劑混合，而且組成不斷變化，因此帶來(lái)一些問(wèn)題，須充分重視：
①要注意溶劑的互溶性，不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動(dòng)相，有些溶劑在比例內(nèi)混溶，出范圍就不互溶，使用時(shí)更要引起注意。當(dāng)溶劑和緩沖液混合時(shí)，還可能析出鹽的晶體，尤其使用磷酸鹽時(shí)需小心。 
②梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高，以良好的重現(xiàn)性。進(jìn)行樣品分析前須進(jìn)行空白梯度洗脫，以辨認(rèn)溶劑雜質(zhì)峰，因?yàn)槿跞軇┲械碾s質(zhì)富集在色譜柱頭后會(huì)被強(qiáng)溶劑洗脫下來(lái)。用于梯度洗脫的溶劑需徹底脫氣，以混合時(shí)產(chǎn)生氣泡。 
③混合溶劑的粘度常隨組成而變化，因而在梯度洗脫時(shí)常出現(xiàn)壓力的變化。例如甲醇和水粘主度都較小，當(dāng)二者以相近比例混合時(shí)粘度很多，此時(shí)的柱壓大約是甲醇或水流動(dòng)相時(shí)的兩倍。因此要注意梯度洗脫過(guò)程中壓力過(guò)輸液泵或色譜柱能承受的壓力。 ④每次梯度洗脫之后須對(duì)色譜柱進(jìn)行再生處理，使其恢復(fù)到初始流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱，使固定相與初始流動(dòng)相平衡。
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