小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.         標準品的稀釋：提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120ng/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 60ng/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 30ng/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 15ng/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 7.5ng/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 2.         加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   4.         配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.         溫育：操作同3。8.         洗滌：操作同5。9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.     測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結：  計算  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5． 封板膜只限性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個月 

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