雞IgG測試劑盒
一、產(chǎn)品名稱
通用名：雞傳支IgG測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名：Diagnostic Kit for chicken Antibodies to Infectious Bronchitis Virus(ELISA)
二、包裝規(guī)格 96T×1/盒、96T×2/盒
三、預(yù)期用途 雞（InfectiousBronchitis，IB）是由引起雞的一種急性、高度接觸呼吸道，本病呈世界性分布，是嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)的主要疫病之一。疫苗免疫是和控制雞發(fā)生的途徑，而免疫后體水平的高低反映實(shí)際的疫苗免疫效果，直接關(guān)系到免疫雞群對(duì)禽的力。
雞傳支IgG測試劑盒適用于：雞血清體的檢測，以確定被檢雞是否感染過雞或免疫雞體內(nèi)體水平；評(píng)估雞群感染IBV的風(fēng)險(xiǎn)程度；了解雛雞母源體水平，為IBV免疫程序的制定提供參考。
四、試劑盒原理
雞傳支IgG測試劑盒系由預(yù)包被雞（IBV）重組N蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測雞血清或血漿中雞特異性體。實(shí)驗(yàn)時(shí)，在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和稀釋的待檢血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有雞的特異性體，則將與酶標(biāo)板上原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的體和其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上原體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加T底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有特異性體。
五、雞傳支IgG測試劑盒組成
酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照
六、儲(chǔ)存及期
于2～8℃避光保存，期為12個(gè)月。
包被板開封后請(qǐng)于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個(gè)月。
七、適用儀器 含450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。
雞傳支IgG測試劑盒操作步驟
一、樣品準(zhǔn)備
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對(duì)照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
二、檢驗(yàn)方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對(duì)照孔分別加入陰、陽性對(duì)照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。
結(jié)果分析
一、參考值
實(shí)驗(yàn)正常的情況下，陰性對(duì)照≤0.10，陽性對(duì)照≥0.6。
二、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋
1.C.O（臨界值）=0.13+陰性對(duì)照孔均值（陰性對(duì)照孔均值低于0.07時(shí)以0.07計(jì)算）。
2.未曾免疫雞群：樣品A值≥C.O為陽性；樣品A值＜C.O為陰性。
3.免疫雞群：監(jiān)測并記錄樣本當(dāng)時(shí)的體水平，根據(jù)結(jié)果分析體水平的分布及雞群免疫狀態(tài)的動(dòng)向。
